尊龙凯时有机磷与氨基甲酸酯类农药残留速测试剂盒使用说明书（酶抑制法）

1. 适用范围

本测试剂盒专为检测新鲜蔬菜中的有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留量而设计。

2. 检测依据

本剂盒的使用方法依据国家标准GB/T5009199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》。通过遵守这一标准，确保检测结果的准确性和可靠性。

3. 试剂盒组成

以下为不同规格（100T、200T、500T）试剂盒的组成：

• 显色剂：1瓶 / 2瓶 / 5瓶
• 底物：1瓶 / 2瓶 / 5瓶
• 胆碱酯酶：1瓶 / 2瓶 / 5瓶
• 缓冲试剂浓缩液：1瓶 / 1瓶 / 1瓶
• 说明书：1份 / 1份 / 1份

4. 溶液配制

为确保测试准确，需进行以下溶液的配制：

• 缓冲溶液：将500mL纯净水与5mL缓冲试剂浓缩液混合均匀，室温保存。
• 胆碱酯酶：无需配制，使用时直接取100μL，冷藏保存于4℃。
• 显色剂：无需配制，使用时直接取100μL，冷藏保存于4℃。
• 底物：使用时将10mL纯净水与底物溶解，直接取100μL，冷藏保存于4℃。

5. 样品提取

选取有代表性的蔬菜样本并清洁后取样。对于叶菜类，一般选取来自不同植株的叶尖部样本；果菜则选择不同个体的表皮。具体操作如下：

• 叶菜取2克1cm见方的叶尖部分置于样品杯，茎类及水果取3克1cm见方的表皮。
• 加入10mL缓冲液，震荡1-2分钟；静置2分钟后进行检测。

注意某些样品如葱蒜、萝卜等可能因植物次生生物质导致假阳性，建议采用整株浸提以减少干扰。

6. 操作步骤

6.1 对照测试

在一支干净试管中加入25mL缓冲溶液、100μL显色剂、100μL胆碱酯酶，混匀后置于37℃恒温设备中10分钟，接着加入100μL底物，迅速混匀并倒入比色皿，使用农残检测仪进行对照测试。

6.2 样品测试

另取一支干净试管，加入25mL样品提取液、100μL显色剂和100μL胆碱酯酶，混匀后于37℃恒温设备中置10分钟，加入100μL底物并快速混匀，倒入比色皿进行样品测试，仪器将显示抑制率。

操作提示：在加底物环节中可提前将底物加入比色皿，以减少多样品检测时的误差。

7. 结果判定

使用分光光度计于412nm测定吸光度值三分钟内的变化，计算公式为：抑制率（%）=[(△A0-△At)/△A0]×100%。若抑制率超过50%，检测结果为阳性，表明蔬菜中存在高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药。阳性样品需重复检验两次以上，必要时可采用其他方法以确认具体农药种类及含量。

8. 注意事项

• 酶活性要求：本试剂盒中酶的正常活性须满足△A0≥0.3，符合国标方法要求。
• 使用时须遵循“一瓶配制一瓶”原则，使用前需摇匀，避免变质。
• 禁止将吸出的试剂再次吸入瓶内，以防交叉污染。
• 对于颜色干扰严重的样品，可用活性碳进行脱色处理后进行过滤或离心，以获得清液作为样品提取液。

9. 贮存条件与有效期

尊龙凯时的试剂盒应保存于4℃冰箱中，保质期为12个月，常温下可保存3个月。