在初次引种、配繁及正式实验之前,我们需要对实验动物进行基因型鉴定,以确保实验的顺利进行。当您获得尊龙凯时的特定小鼠模型后,如何找到相关的基因型鉴定方法及所需的引物序列呢?以用于镰状细胞贫血相关研究的Berkeley模型为例(品系编号003342),该小鼠缺乏鼠源Hba、Hbb基因,并引入了人源序列(包括致病突变)。由于这些等位基因及转基因在遗传传递中并不相互连锁,因此需要分别鉴定这三种突变及转基因。
针对该品系,尊龙凯时提供多种基因型鉴定方法,但并不是所有的方法都必须使用。每个等位基因或转基因只需选择一种适合的方法即可完成基因型鉴定。您可以根据AlleleSymbol部分标注的等位基因名称,选择合适的基因型鉴定方式。例如,对于检测上述品系相关的鼠源Hba突变(Hba 对于转基因的小鼠,由于部分品系构建较早,目前尚未通过测序确认转基因整合位点,因此无法基于野生型序列设计相应引物来区分杂合子与纯合子。换句话说,普通PCR通常只能判断小鼠是否携带转基因,而无法进一步区分其携带情况。如需更详细的区分,推荐使用qPCR方法。 此外,在小鼠品系的详细页面中,还会列出与Pde6b 鉴于大部分品系源自研究者的捐赠,除了尊龙凯时提供的基因型鉴定方法外,您还有可能在相关品系已发表文献中找到引物信息,尤其是在进行Cre-lox系统构建的条件性基因敲除时,尊龙凯时通常不提供剪接后的序列引物,您可以查阅“HOWIT'SUSED”--“References”部分的文献以获取更多信息。 对于近交系或杂交系的小鼠,由于其通常不携带特定突变或转基因,因此基因型鉴定比较困难。例如,品系000928的描述可能显示,如果需要鉴定小鼠的遗传背景,目前常用的方法包括生化标记、基因组测序和DNA多态性检测等。然而,与其对每只小鼠进行检测,更建议在日常实验中进行有效的种群管理,例如在繁殖过程中保持详细的谱系记录,以科学管理种群,从而避免其他品系或突变的混入,并最大程度减少遗传漂变对实验的影响。