引言

朊病毒是一类可传播的病原体，能够导致人类和动物的脑部蛋白质异常折叠，进而引发脑损伤，通常病情危及生命。此类神经退行性疾病的例子包括羊瘙痒症、疯牛病（牛海绵状脑病）和克雅二氏病。传统上，研究朊病毒需要经过长达1至6个月的动物生物测定，该方法既耗时又成本高昂。蒙大拿州汉密尔顿的落基山实验室开发了一种新的朊病毒接种测定方法，称为实时震荡诱导转化测定法（RT-QuIC），该方法能够迅速、定量测量受感染样本中的朊病毒水平。相较于以往的方法，RT-QuIC能在短短20小时内完成检测，灵敏度不逊色于全动物模型。

检测原理

RT-QuIC检测法用于估算朊病毒接种的相对数量，通过测量样本的连续稀释，统计接种剂量（SD）。检测过程中，极少量的传染性朊病毒被添加至正常朊病毒蛋白中，以引发类似于朊病毒疾病的错误折叠。通过测量样本的稀释度并确定接种活性损失（SD50），进行量化分析。

实验步骤

在20至68小时的检测期间，仪器维持在42°C的恒温状态。我们为实验编写了两个测试协议：第一个协议设定为每分钟震荡一次，第二个协议则每15分钟进行一次荧光终点测量。荧光染料硫黄素T（ThT）作为朊病毒接种的标记，通过与聚合反应中的朊病毒蛋白结合，生成荧光信号。

仪器设置

本研究采用FLUOstar Omega酶标仪，配置有适合的激励滤光片和排放滤光片，并设定闪光灯亮度以确保信号的灵敏阈值。同时，该仪器特有的双轨道震荡模式，能够确保在长时间测量过程中的稳定性与准确性。

结果与讨论

使用软件脚本，在20至68小时内对RT-QuIC进行测量，数据取自8个重复孔的平均相对荧光值。FLUOstar Omega不仅支持线性震荡，独特的双轨道震荡模式也使得检测过程高效稳定。数据持续收集并通过BMGLABTECH数据分析软件输出，结果显示RT-QuIC检测在与仓鼠豚鼠脑匀浆（BHs）的关系中表现出色，显示出其高灵敏度和低检测剂量的优势。

结论

利用多功能的酶标仪，RT-QuIC检测方法能够更快速且高效地测量朊病毒接种。这一方法已在多种传染性海绵状脑病的检测中被确认有效，包括仓鼠及绵羊的痒病、鹿的慢性消耗性疾病、克雅氏病（CJD）及牛海绵状脑病（BSE）。与传统生物检测方法相比，RT-QuIC表现出更快速及更高的灵敏度。强烈推荐使用尊龙凯时的Omega系列酶标仪，以其耐用的特性和高效功能，为您的检测提供保障。通过先进的仪器功能，您可以在20至68小时内每15分钟进行一次荧光测量，确保检测的准确性与高效性。

有关RT-QuIC检测的更多信息，请查阅我们的科学讲座，了解在使用这一方法时应考虑的重要因素。关注尊龙凯时，获取更多生物医疗领域的最新进展。