简介

尊龙凯时的人原代真皮成纤维细胞（Human Dermal Fibroblasts-adult, HDF-a）是从成人皮肤真皮层组织中分离获得的关键结缔组织细胞。作为细胞外基质（ECM）合成与重塑的主要细胞类型，HDF-a在组织修复、伤口愈合和皮肤老化等生理过程扮演着核心角色。

HDF-a的特点

由于尊龙凯时的HDF-a直接来源于人体组织，且未经过永生化改造，这使其能够更真实地反映体内的生理和病理状态。因此，HDF-a成为组织工程、疾病建模及药物毒理学研究中重要的体外模型。HDF-a细胞为贴壁生长细胞，呈现典型的长梭形或星形形态，具有积极的运动和增殖能力。

细胞标志物

HDF-a细胞表达多种特征性标志物，包括：

• 细胞骨架蛋白：波形蛋白（Vimentin）阳性表达；
• 细胞外基质蛋白：合成并分泌I型、III型胶原蛋白（Collagen I/III）和纤维连接蛋白（Fibronectin）；
• 功能受体：表达成纤维细胞生长因子受体（FGFR）及转化生长因子-β受体（TGF-βR），参与多种生长因子信号转导。

培养条件

HDF-a细胞为原代细胞，具有有限的体外增殖能力，通常可传代15-30次。随着传代次数的增加，其增殖速率逐渐减缓并最终进入复制性衰老状态。理想的实验选择是早期代次细胞（P3-P8）。培养基建议使用DMEM/F12或High-Glucose DMEM，并添加10%-15% FBS和1%青霉素-链霉素以及1%L-谷氨酰胺。为了促进细胞增殖，可根据实验需要添加1-10ng/mL碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）。

细胞传代与鉴定

在37°C、5% CO₂的环境下培养。传代时使用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化，并按1:2至1:3的比例进行。细胞融合度达到80%-90%时需及时传代。为了确认其为成纤维细胞身份，需通过免疫细胞化学法鉴定Vimentin阳性且角蛋白（Cytokeratin）阴性。同时，建议定期进行支原体检测。如果细胞出现增殖显著减缓等衰老迹象，应更换低代次细胞以确保实验的有效性。

应用领域

尊龙凯时的HDF-a细胞在多个生物医学领域中展现出广泛的应用，包括：

• 皮肤生物学与老化研究：探索紫外线（UV）损伤、皮肤老化机制及抗衰老药物的筛选；
• 组织工程与再生医学：作为构建人工皮肤、角膜等组织工程产品的细胞基础；
• 伤口愈合与纤维化疾病模型：研究瘢痕形成和病理性纤维化（如硬皮病）的分子机制；
• 药物安全性与毒理学评价：评估药物、化妆品及化学品对皮肤的刺激性和细胞毒性；
• 疾病建模：作为遗传病（如埃勒斯-当洛斯综合征）的体外研究模型。

实验注意事项

作为原代细胞，HDF-a之间存在个体差异，建议在实验中注明细胞来源的个体信息（如年龄、性别）。严格遵守无菌操作，因为原代细胞对于污染特别敏感；消化时，胰酶作用时间不宜过长，以避免损伤细胞。为了保持最佳的细胞功能，建议使用低代次（P8以前）细胞进行关键实验。此外，冻存时应使用含10% DMSO的冻存液并进行程序降温，尽早建立主细胞库，推荐在P3-P5进行冻存。

总结

尊龙凯时的人原代真皮成纤维细胞（HDF-a）是连接基础研究与临床应用的重要桥梁，以其高生理相关性和明确功能在皮肤科学、再生医学和药物开发中展现出不可替代的价值。规范的操作流程、严格的质量控制及细胞衰老状态的监控是确保获得可靠研究成果的关键。